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探討微波輻射對(duì)雄鼠的生精功能的影響及巴戟天對(duì)損傷后雄鼠的生精功能的修復(fù)作用。
一、材料與方法:
(一)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型和分組:選取成熟雄性大鼠24只,體重范圍264~358g,平均(316±30)g,(由福建醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究中心提供),隨機(jī)平均分為三組,每組8只放入鼠籠中,動(dòng)物自由體位,在相對(duì)濕度為45%,常溫下進(jìn)行飼養(yǎng)。
①空白組:常規(guī)飼養(yǎng),不輻照。
②輻射組:對(duì)講機(jī)(深圳特易通TYT-3207),頻率150MHz,照射時(shí)間均為2h/d,兩部對(duì)講機(jī)(一部用于發(fā)射信號(hào),一部用于接收信號(hào))天線距離為15cm,置于鼠籠中央,大鼠距離對(duì)講機(jī)天線約12cm,經(jīng)測(cè)定輻照強(qiáng)度300μW/cm2,持續(xù)一周。
③給藥組:采用相同條件對(duì)講機(jī)輻照,照射時(shí)間均為2h/d,持續(xù)一周。同時(shí)每天在卯時(shí)(5:00~7:00)巴戟天(注:煎煮巴戟天:取720g巴戟天用7倍水浸泡1.5h,煎煮30min,藥渣用4倍水煎煮20min,最后2者混合濃縮成240ml)灌胃給藥,30g/kg,1次/d,持續(xù)一周。
(二)指標(biāo)的測(cè)定:
1.睪丸指數(shù)、附睪指數(shù):在輻照的第7天三組的大鼠逐一稱重,大鼠腹腔注射10%水合氯醛(350mg/kg)麻醉后,取左側(cè)睪丸和附睪,并逐一稱重。根據(jù)睪丸指數(shù)=睪丸重量/體重;附睪指數(shù)=附睪重量/體重,計(jì)算每只大鼠的睪丸指數(shù)和附睪指數(shù)。
2.精子活動(dòng)率、精子密度:
取右側(cè)附睪尾,稱重后置于15ml生理鹽水(37℃預(yù)溫)的小平皿中,用眼科小剪子剪碎,吸管吹打,四層擦鏡紙過濾,最后將懸液稀釋至20ml。
精子懸液置于37℃孵育15分鐘,用紅細(xì)胞計(jì)數(shù)板,在高倍鏡下計(jì)數(shù)200個(gè)精子中活動(dòng)精子數(shù)。于60℃水浴中處死精子,按紅細(xì)胞計(jì)數(shù)法,計(jì)數(shù)5個(gè)中方格內(nèi)精子數(shù)。從而計(jì)算出精子活動(dòng)率、精子密度(每克附睪尾所含的精子數(shù))。
3.數(shù)據(jù)處理:實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用(x±s)表示,采用SPSS統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)和單因素方差分析。
4.睪丸的組織學(xué)觀察:
將所取出的右側(cè)睪丸置于4%多聚甲醛固定過夜、常規(guī)脫水、透明、包埋,切片4μm,蘇木精-伊紅(HE)染色后封片。在顯微鏡下觀察睪丸切片,高倍鏡下任取4個(gè)管腔,用“+~++++”表示每個(gè)管腔中的精子的數(shù)量。
第十二屆“挑戰(zhàn)杯”省賽作品 省賽三等獎(jiǎng)
2010年10月 作品在《解剖學(xué)研究》雜志上發(fā)表。